신경펩타이드 Y(NPY)의 검출은 주로 정량 분석을 위한 효소 결합 면역흡착 분석(ELISA)과 조직 국소화를 위한 면역조직화학(IHC)을 포함한 면역학적 방법에 의존합니다.
ELISA는 인간 혈청, 혈장, 조직 균질액, 세포 용해물 및 세포 배양 상층액과 같은 생물학적 시료에서 NPY 수준을 정량적으로 결정하는 데 일반적으로 사용되는 방법입니다. 이는 일반적으로 경쟁적 억제 원리를 사용합니다. 즉, NPY 단일클론 항체를 마이크로플레이트에 코팅하고 비오틴{1}} 표지 항원과 표적 항원을 포함하는 샘플을 모두 추가합니다. 표적 항원은 항체에 결합하기 위해 표지된 항원과 경쟁합니다. 세척 단계 후에 HRP-라벨이 붙은 아비딘과 기질 TMB가 발색을 위해 첨가됩니다. 색상의 강도는 샘플의 NPY 농도에 반비례합니다. 이 방법은 일반적인 검출 범위가 24.69 pg/mL ~ 2000 pg/mL이고 검출 하한이 9.59 pg/mL 미만으로 높은 감도와 특이성을 제공합니다.
IHC는 조직 절편 내에서 NPY의 발현 및 분포를 국소화하는 데 사용됩니다. 특정 항체를 활용하여 조직 내 NPY에 결합하고 시각화를 위해 발색 반응을 사용함으로써 이 방법을 사용하면 여러 조직에서 NPY 발현의 정성적 또는 반{1}}정량적 분석이 가능합니다.
